光散射检测仪检测蛋白聚合-散射光谱技术分析如何分类?简述其检测原理

2024-02-25 17:51:13 来源:高信仪器仪表网 作者:admin

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  1. 实验室测定蛋白质分子量的方法有哪些?
  2. 静态光散射方法能够测定聚合物的什么
  3. 蒸发光散射检测器的检测步骤

1、实验室测定蛋白质分子量的方法有哪些?

常用的方法包括:一维凝胶法: 使用凝胶电泳分离蛋白质,然后测定蛋白质含量。二维凝胶法:使用两种不同的凝胶溶剂分离蛋白质,然后测定蛋白质含量。质谱法: 使用质谱仪测定蛋白质的分子质量。

用化学分析方法测出蛋白质中某一微量元素的含量,并假设分子中只有一个这种元素的原子,就可以计算出蛋白质的最低分子量。

.凝胶过滤法 凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子量的大小。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一特定的蛋白质分子量范围,在此范围内,分子量的对数和洗脱体积之间成线性关系。

目前蛋白质分子量测定中最常用的几种方法,包括粘度法、凝胶过滤层析法、凝胶渗透色谱法、sds-凝胶电泳法、渗透压法、电喷雾离子化质谱技术、基质辅助激光解吸电离质谱技术、光散射法、超速离心沉降法。

需要测定蛋白质的分子量,可以直接用SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳就可以了,层析法不能测定蛋白子的分子量,但是可以根据分子量的大小来分离开蛋白。

2、静态光散射方法能够测定聚合物的什么

膜渗透压。用半透膜通过渗透压测定的方法,也应该是一种物理化学方法。4,气相渗透法(VPO)。利用纯溶剂与加入溶质的溶液饱和蒸气压不同来测定分子量。测出的是数均分子量。5,光散射/小角激光光散射(LALLS)。

如蛋白质聚集过程)动力学性能的研究静态法:绝对重均分子量 (Mw)第二维里系数 (A2)均方根回旋半径 (Rg)Zimm, Berry和Debye曲线Dn/dc值:作静态光散射求分子量时,需要输入样品溶液的dn/dc 值。

凝胶渗透色谱法:通过固定温度下在固定流速流经孔径分布有一定规律的固定相柱时的渗透现象来测定分子量。拉曼光谱法:利用聚合物分子不同的拉曼光谱特征来测定分子量。

聚合物分子量的测定方法概括如下:粘度法测相对分子量(粘均分子量Mη) 用乌式粘度计,测高分子稀释溶液的特性粘数[η],根据Mark-Houwink公式[η]=kMα,从文献或有关手册查出k、α值,计算出高分子的分子量。

3、蒸发光散射检测器的检测步骤

蒸发:载气把液滴从雾化室运送到漂移管进行蒸发。在漂移管中,溶剂被除去,留下微粒或纯溶质的小滴。蒸发光散射检测器采用低温蒸发模式,维持了颗粒的均匀性,对半挥发性物质和热敏性化合物同样具有较好的灵敏度。

【答案】:蒸发光散射检测器(EvaporativeLight-scatteringDetector)是通用型检测器,可以检测没有紫外吸收的有机物质,如人参皂苷、黄芪甲苷等。

温度计算方法:ELSD检测器的温度一般介于30°C(室温)至50°C之间。在ELSD工作过程中,样品溶液会流经一个热器,这个热器控制样品流经时的温度。温度的控制非常重要,因为它对于样品的蒸发速率和峰的大小有直接影响。

方法原理: 本品加乙酸乙酯提取,合并提取液回收溶剂至干,残渣加甲醇溶解,摇匀,滤过,续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离,用蒸发光散射检测器检测,计算出其含量。

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