荧光分析仪的曲线调整，荧光分析仪的曲线调整原则

大家好，今天小编关注到一个比较有意思的话题，就是关于荧光分析仪的曲线调整的问题，于是小编就整理了5个相关介绍荧光分析仪的曲线调整的解答，让我们一起看看吧。

1. 怎样正确使用原子荧光分光光度计及注意事项
2. 用原子荧光测汞,在做标准曲线的时候很乱,七上不下的,怎么回事?
3. StepOnePlus实时荧光定量PCR仪怎么设置融解曲线
4. 荧光分析曲线出现偏差怎么调整
5. 荧光分光光度法为什么会弯曲?

1、怎样正确使用原子荧光分光光度计及注意事项

分光光度计是一种精密的测量仪器，使用时需要注意以下几点事项：防止光电管疲劳、正确拿取比色皿、比色皿的液体容量、对照调零、更换溶液时的盖子、保持比色皿清洁。

电压要稳定，不要频繁开关机。在使用之前，废液管内一定要有水（从下端倒入即可）。开机时，先开空气阀，后开乙炔阀。空气压力在 0.2~0.3 之间，乙炔瓶压力在 0.05~0.1 之间。

注意事项：设备存放的地方要放入一些干燥剂，以免受潮影响使用效果。拿比色皿时，只能捏住比色皿的毛玻璃面，不能碰比色皿的光学表面。比色皿不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗涤，也不能用毛刷清洗。

分光光度计使用注意事项是多选题如下：注意事项：设备存放的地方要放入一些干燥剂，以免受潮影响使用效果。拿比色皿时，只能捏住比色皿的毛玻璃面，不能碰比色皿的光学表面。

分光光度计的使用方法：预热仪器：为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。

2、用原子荧光测汞,在做标准曲线的时候很乱,七上不下的,怎么回事?

原子荧光测汞不稳定原因如下。用原子荧光法测汞元素时，因为汞自身不稳定所以对原子荧光光度计的RSD值要求很高。在前期处理时样品受到了污染。汞的记忆效应很大，这也是原子荧光光谱法通病。

除过前面两位的您检查一下：1。看是否对完光忘了拿下挡光板（即挡光板还留在原子化器上。

都可以从以下几个方面去找原因。要看下标准溶液是否准确，时间是否过长，标准低，样品结果就高。配制多点曲线看一下。然后看下标准介质和样品介质是否相同。还要看下前处理的方法是否正确，是否有负干扰。

一般用原子荧光光度计测汞是最稳定的，你的线性差有可能是机子的原子化器受到污染了，也有可能是标夜过期，或者受到污染等。原因需要一个一个的排查。

亲用的什么型号啊？我这边实验室是SK-2003A原子荧光。一般汞元素记忆效应比较严重。如果仪器的管路过长，或者结构过于复杂就容易测试不稳定。同时空白高有时也是试剂造成的。

3、StepOnePlus实时荧光定量PCR仪怎么设置融解曲线

时间还需根据仪器使用要求进行设置，如ABI StepOne、Bio-Rad CFX9Roche LightCycler 480至少需要设置30s，而ABI 7500则至少需要设置34s。qpcr拓展知识： Quantitative Real-time PCR，中文名是 实时荧光定量PCR。

黄色的三角符号表示flag我们用的是step one plus 的PCR仪， 在分析结果的时候，会显示Ct值等数据，同时也会在后面标出具体的flag。实时荧光定量pcr仪，由荧光定量系统和计算机组成，用来监测循环过程的荧光。

steponeplus荧光定量pcr仪ct值没有的原因如下。循环数不够（一般不超过45循环，不仅背景值提高，定量也不准）。

解决方法如下：CT值高不，如果接近循环数尾声，那就是值不准了，达不到梯度下限值，需提高模板浓度。（我们引物浓度和体系一般定量了的）另外尽可能都配成MIX，加样仔细点，一般都没问题的。

steponeplus可直接在机器上触控操作，简便快捷，和7500两者做出的结果扩增曲线和溶解曲线没有太大的差异，当然需要注意的是不同仪器的耗材不要混着用，纯粹做realtime-PCR的话两者都可以用。

4、荧光分析曲线出现偏差怎么调整

调整荧光分析曲线的偏差可以从荧光仪自身和被测样本看。

做个阳性对照如果还是不平滑的话那就是你的试剂盒出了问题，需要更换再重新做线。一定要找准根因并且去做解决，不然会越弄越麻烦最后可能把机器搞坏。

根据你说的荧光强度差值在100-1000以内，那么仪器检出限等于3倍的空白值得标准偏差除以斜率，仪器检出限最多能小于0.06。方法检出限在0.2左右，应该算是比较高的了。不能说是灵敏度很高。

可能是试剂出问题；否则的话，将你原来基因的模板浓度加大或调一下温度（一般55或60℃），这样还不行的话。估计得换引物和探针了，一定要确保你基因没有找错，不是染色体组的序列，且引物设计是在保守序列。

5、荧光分光光度法为什么会弯曲?

关键是8和16微克的两个点影响大；可以称量取样量，进行校正；做一下吸收曲线，校正一下 波长。

原子吸收分光光度法中，吸光度a与样品浓度c之间具有正比例的关系。当浓度高时一般会出现曲线会产生弯曲现象。

由于分光光度计分光系统中的色散元件分光能力差，即在工作波长附近或多或少含有其他杂色光，杂散光（非吸收光）也会对比尔定律产生影响，这些杂色光将导致朗伯-比尔定律的偏离。

紫外荧光法和化学荧光法的异同如下。原理不同：紫外分光光度计，就是根据物质的吸收光谱研究物质的成分、结构和物质间相互作用的有效手段。荧光分光光度法是根据物质的荧光谱线位置及其强度进行物质鉴定和含量测定。

而荧光分光光度计是给与一个激发波长后，到达激发态，再发射光，所以检测的是物质发射的光，检测信号与发射器不在一条线上。

到此，以上就是小编对于荧光分析仪的曲线调整的问题就介绍到这了，希望介绍关于荧光分析仪的曲线调整的5点解答对大家有用。